心悦胶囊：改善小型猪慢性心肌缺血导致的心肌损伤

心悦胶囊：改善小型猪慢性心肌缺血导致的心肌损伤

郭明博士

男，中国中医科学院西苑医院主治医师，中西医结合心血管病专业博士。作为主要完成人参与国家级科研项目3项，发表学术论文26篇，其中SCI论文14篇，总影响因子>40，总引用100余次。参与撰写专著1部。

近年来，尽管经皮冠状动脉介入治疗和冠状动脉搭桥术发展迅速，但冠状动脉粥样硬化引起的心肌缺血仍然是全球心血管疾病和死亡的主要原因。慢性冠心病患者由于自身血管问题无法接受冠状动脉介入治疗和冠状动脉搭桥手术，心绞痛症状得不到改善。促进缺血心肌血管新生是这类患者非常有潜力的治疗措施。在冠心病动物模型中，基因改造和干细胞治疗可以显著促进缺血心肌血管新生，但临床试验很少达到同样的治疗效果。因此，寻找能够促进冠状动脉血管新生的新型药物，是缺血性心脏病心肌血管新生、改善心脏功能的治疗措施。

心悦胶囊的主要成分为西洋参茎叶提取物—西洋参茎叶总皂苷(Panax，PQS)。我们前期研究证实PQS能增加大鼠急性心肌梗死后缺血心肌VEGF及βFGF的表达，以及提高心肌缺血模型大鼠的心肌缺血VEGF及βFGF的表达，但小动物研究的结果在大动物实验或临床试验中难以复制，且PQS在大动物模型中尚缺乏。因此，我们利用巴马小型猪慢性心肌缺血模型，探讨PQS对巴马小型猪心肌缺血的影响，观察PQS是否对慢性缺血后小型猪缺血心肌的心脏功能、心肌代谢及血管新生产生改善作用。

将32只健康巴马小型猪随机分为手术组（n=26）和假手术组（n=6）。开胸后在左前降支近端放置缩窄环建立​​慢性心肌梗死模型。建模2个月后所有动物行冠状动脉造影评估模型建立情况心悦胶囊：改善小型猪慢性心肌缺血导致的心肌损伤，随后行首次心脏超声评估心脏功能，行18F-FDG-PET评估心肌代谢。之后将手术组存活动物随机分为模型组（3只）、欣悦胶囊组（0.18 g/kg/d）、阿托伐他汀组（1.5 mg/kg/d），每6只动物分别饲喂18F-FDG-PET和18F-FDG-PET。采用糖原染色评价缺血心肌组织细胞核密度及细胞直径,免疫荧光标记SMA-α评价缺血心肌小动脉密度。通过缺血心肌蛋白质组学检测,明确手术对心肌蛋白质的总体影响及心悦胶囊对术后蛋白质变化的调控作用。采用液相质谱法检测小型猪含药血浆中的入血成分。将蛋白质组学结合网络药理学的结果聚焦心悦胶囊促进血管新生的潜在靶点。最后通过印迹和免疫组化技术验证目标蛋白。

结果显示，术后2个月，与假手术组相比，手术组左心室射血分数（LVEF）及左心室缺血区壁增厚率（WT%）均明显降低（P

图 1 超声心动图评估左心室整体和局部功能

图2 18F-FDG PET评价左心室心肌葡萄糖代谢

给药一个月后,与模型组比较,心月胶囊和阿托伐他汀均能显著增加缺血心肌小动脉密度(P

图3 免疫荧光SMA-α染色

图4 通过糖原染色评估核密度和细胞直径

iTRAQ标记蛋白质组学结果显示，与假手术组比较，模型组共有341个蛋白质显著上调，392个蛋白质显著下调；与模型组比较，心月胶囊组共有149个蛋白质显著上调，184个蛋白质显著下调。IPA软件分析显示，这些差异表达蛋白主要富集在线粒体损伤、氧化磷酸化、急性期反应、补体等途径；心月胶囊组与模型组相比发生显著改变的差异表达蛋白主要富集在血液发育与功能、组织形态、心血管发育与功能、结缔组织发育与功能、激素免疫反应等生理系统功能上。与模型组比较，PQS组可显著改变32个与血管生成功能相关的蛋白质。采用液相质谱-色谱法(LC-MS)对猪含药血浆进行检测,结果显示有5种成分进入血液:人参皂苷Rc、Rb2、Rb3、Rd和F11。通过网络药理学对这5个化合物进行鉴定。利用血搜库进行靶标预测,结合蛋白质组学结果,最终锁定5个目标蛋白(CDH2、PRKCD、ICAM-1、ATP5B和HRG)。blot和免疫组化结果证实,用药1个月后,模型组缺血心肌组织HRG和PRKCD表达水平显著高于假手术组(P