小鼠微小病毒：首个被发现的细小病毒，常见于实验室小鼠

小鼠微小病毒：首个被发现的细小病毒，常见于实验室小鼠

今天是关于细小病毒的最后一章 - 小鼠病毒/1/MVM，这是 20 世纪 60 年代发现的第一个细小病毒。

介绍

小鼠微小病毒

小鼠细小病毒（MVM）是啮齿类细小病毒1型的典型病毒，属于细小病毒科细小病毒属。MVM存在多种变异株，其中MVMp是感染成纤维细胞来源细胞的原型株，MVMi是感染T淋巴细胞的免疫抑制株。

MVM 是一种实验室小鼠常见感染，具有高度传染性。病毒可通过受感染小鼠的粪便和尿液传播，也可通过污染物和鼻腔分泌物传播。成年小鼠通常没有临床感染症状，但实验性感染可在胎儿发育期间或出生后不久造成多器官损伤。

病毒转录

MVM 使用 p4 和 p38 上的两个转录启动子和 p95 上的单个多聚腺苷酸化位点来创建 3 种主要大小的 mRNA，称为 R1、R2 和 R3，所有这些 mRNA 都去除了 p46 和 p48 之间的短内含子序列。R1 由 p4 产生，并翻译为非结构蛋白 1 (NS1)。然而，在一些 P4 转录本中，p10 和 p40 之间的第二个内含子也被去除，从而产生编码约 25 kDa NS2 蛋白的 R2 mRNA。它们与 NS1 共享 85 个 N 端氨基酸序列，然后在到达短中央内含子之前被剪接成替代阅读框架，其中可以添加 2 个不同的 C 端六肽。与使用 P4 启动子的转录本 R1 和 R2 不同，R3 转录本产生衣壳蛋白 VP1 和 VP2，并需要从 p38 启动子转录。

DNA损伤反应（DDR）

MVM 在感染期间会诱发 DNA 损伤反应 (DDR)，这对于有效复制至关重要。ATM 通路仅通过 Chk2 介导的反应激活。尚不清楚病毒蛋白或活跃的病毒复制是否会激活 DDR，但紫外线灭活的 MVM 不会引发反应，这表明 MVM 病毒体或 MVM 基因组本身的存在不会引起观察到的 DDR 激活。

MVM诱导细胞凋亡的机制

MVM 诱导的细胞周期停滞机制已得到部分阐明。在 MVM 感染期间，NS1 介导参与病毒 DNA 复制的细胞因子向 APAR 体的募集，导致细胞基因组复制停止，随后复制叉停滞。因此，MVM 诱导细胞 DDR，该 DDR 被募集到 DNA 损伤机制复合物的 APAR 体，例如 H2AX、Nbs1、RPA32、Chk2、p53 和 ATM。这会导致细胞周期停滞，在 MVM 的情况下，细胞周期停滞发生在 S/G2 期，具体取决于细胞类型和实验条件。虽然病毒 DNA 和 NS1 蛋白是诱导 DDR 所必需的，但 NS2 也是必不可少的，因为用缺乏 NS2 的 MVM 突变体感染 A9 细胞会触发类似于野生型 (wt) 病毒的 DDR 反应。 NS1 的异位表达与 DNA 损伤标记物 yH2AX 的磷酸化水平增加有关，尽管其水平远低于病毒感染细胞中观察到的水平。NS1 过表达也已被证明会诱导细胞周期停滞，但其机制可能与整体病毒激活不同，因为 NS1 过表达除了 S 和 G2 之外，还发生在 G1 期。据报道，NS1 表达与单链 DNA 断裂有关，导致细胞 DNA 复制停止。转移到 APAR 的 DNA 损伤机制成分以活性磷酸化形式存在。毛细血管扩张性共济失调突变蛋白 (ATM) 是 DNA 损伤检查点的关键调节因子，是一种参与这些因子磷酸化的激酶，因为可以使用特定的 ATM 抑制剂来降低磷酸化。

重要的是，ATM 介导的 DDR 信号通路既参与 MVM 诱导的细胞周期停滞的维持，也参与病毒增殖的调节，因为 ATM 活性的抑制会影响这两个事件。总之，这些结果提供了细胞周期停滞是有效病毒增殖所必需的证据。ATM 信号在 MVM 诱导的细胞周期停滞中的重要性得到了进一步证实，因为在 MVM 感染的细胞中，ATM 磷酸化靶向 Chk2 进行蛋白酶体降解，Chk2 是细胞周期进展所需的磷酸酶。此外，MVM 诱导的细胞周期停滞还以 B1 耗竭为特征，其方式依赖于 DDR 反应通路。由于 DDR 诱导，p53 在 MVM 感染的小鼠细胞中也上调，并且可能与观察到的细胞周期停滞有关。有趣的是，尽管 p53 被激活，但在 MVM 感染期间，p53 的转录靶标 p21 的蛋白质水平仍然很低。病毒本身通过 E3 泛素连接酶诱导 p21 耗竭，该连接酶也重新定位到 MVM-APAR 小体。PCNA 是 MVM 复制所必需的，并作为 p21/E3 泛素连接酶相互作用和降解的支架蛋白。p21 降解是有效病毒复制的必要条件，因为这种蛋白质通过与 PCNA 和 CDK-2 相互作用并抑制 PCNA 和 CDK-2 对该过程产生负面影响。这些结果表明，MVM 能够在多个层面劫持 DDR 和细胞周期机制，以重塑细胞环境并将其重定向到更有效的复制。